一、理论介绍：

研究级显微镜比例测钙采用LED荧光光源，包含340nm和380nm两独立波长的LED照明系统为基于Fura-2的钙成像提供了最佳激发波长,能够实现高精度、稳定、高通量的成像,并具有视频速率-时间分辨率；同时包含一个通道宽谱白光输出（435nm-645nm），3、 可以通过便捷的BNC TTL连接进行控制,从而在20微秒内实现精确的照明控制。

通过膜片钳放大器将离子通道电流以曲线形式表现出来以便于示波器观察或被计算机进行采样，处理和分析。透过其电流-电压(I-V)变换器的结构和工作原理,以及低噪声的设计,将微弱电流信号放大并记录。用玻璃微电极接触细胞膜，以G 欧姆以上的阻抗使之封接，使与电极尖端开口相接 的细胞膜区域与其周围在电学上绝缘，在此基础上固定电位，对此膜片上的离子通道的离子电流进行监测记录。

二、系统组成：

由放大器、显微操作器、拉针仪、抛光仪、防震台与屏蔽网、研究级倒置显微镜、荧光比例成像系统等组成。

 三、膜片钳的主要应用：

用于生物、医学等试验中细胞离子通道pA 到nA 级微小电流测量，以及药物、光电刺激对细胞离子通道电流的影响。通过膜片钳放大器将离子通道电流以曲线形式表现出来以便于示波器观察或被计算机进行采样，处理和分析。透过其电流-电压(I-V)变换器的结构和工作原理,以及低噪声的设计,将微弱电流信号放大并记录。

使用的标本种类繁多。从最早的肌细胞（心肌、平滑肌、骨骼肌）、神经元和内分泌细胞发展到血细胞、肝细胞、耳窝毛细胞、胃壁细胞、上皮细胞、内皮细胞、免疫细胞、精母细胞等多种细胞；从急性分散细胞和培养细胞（包括细胞株）发展到组织片（如脑片、脊髓片）乃至整体动物；从蜗牛、青蛙、蝾螈、爪蟾卵母细胞发展到鸡细胞、大鼠细胞、人细胞等等；从动物细胞发展到细菌、真菌以及植物细胞。研究对象已经不局限于离子通道。从对离子通道（配体门控性、电压门控性、第二信使介导的离子通道、机械敏感性离子通道以及缝隙连接通道等等）的研究发展到对离子泵、交换体以及可兴奋细胞的胞吞、胞吐机制的研究等。

四、研究级倒置显微镜

研究级倒置相差荧光显微镜像系统是生命科学研究不可或缺的科研工具，在电生理、生物、医学研究领域发挥着重要的作用。该系统作为活细胞成像的基础光学平台，拥有灵活的结构，方便利用的光路，可提供高分辨率，高反差的明场和荧光，相差成像，图像分辨率高，广泛应用在免疫学，医学检验学，细胞生物学，神经生物学，发育生物学，分子生物学，光生物学，神经生物学等领域。

该系统可进行活细胞及动植物组织切片观察成像、可实现明场、荧光、相差成像，支持染色体分析、细胞结构、细胞骨架、细胞膜结构、流动性、受体、细胞器结构和分布变化、细胞凋亡；利用荧光标记，测定细胞内如钠、钙、镁、PH等离子浓度及动态变化研究。

五、、荧光比例成像系统：

用于比例成像，相对于常规的单通道钙离子成像，Fura-2比例测钙，可以排除实验浓度、细胞厚度、荧光淬灭等因素所导致的实验数据误差，可以通过公式准确的计算出钙离子浓度。相较于膜片钳系统的微电极封接细胞膜来测定钙离子浓度变化，Fura-2比例测钙可以测定更小的细胞，可以一次覆盖到成像视野内所有的目标细胞，也相对更容易上手操作。

六、培训内容：

膜片钳的组成介绍，膜片钳拉针仪的使用，膜片钳系统的具体应用演示和系统的维护。研究及倒置荧光显微镜的组成，显微镜的聚焦调节，明场和荧光成像，显微镜的维护和清洁。比例测钙成像系统的组成，软件介绍，比例成像和分析，系统维护。

  2024年9月5日将在大型仪器共享服务平台举行膜片钳系统的理论及操作培训，感兴趣的师生请将个人信息发送到chaolife@126.com，收到时间和地点回复即为报名成功，为保障培训质量，理论名额无限制，上机培训名额限10人。

联系人：李老师  18632292164